文章编号：1004-2490(2023)03-0352-12
近江牡蛎受精过程、胚胎及早期幼虫发育特征
王岩1,2,3,吴彪1,2,葛广玉1,2,4,陈夕1,2,
孙秀俊1,2,周丽青1,2,刘志鸿1,2
(1.农业农村部海洋渔业可持续发展重点实验室，中国水产科学研究院黄海水产研究所，山东青岛266071;2.青岛海洋科学与技术试点国家实验室，海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室，山东青岛266071;
3.水产科学国家级实验教学示范中心，上海海洋大学，上海201306;
4.国家海洋设施养殖工程技术研究中心，浙江海洋大学，浙江舟山316022)
摘要：为了解近江牡蛎(Crassostreaariakensis)从受精到早期幼虫发育阶段的发育特性，在水温22~24℃、盐度20~22的实验室环境中对采自山东东营丁字湾海域的近江牡蛎进行人工授精，利用普通光学显微镜和荧光显微镜对近江牡蛎受精、早期胚胎和幼虫发育过程中的形态和核行为变化进行观察，并对这一过程中牡蛎的壳长变化进行了统计分析。结果表明，近江牡蛎成熟的未受精卵呈梨形，卵径为50μm左右，核相处于第一次成熟分裂中期。受精卵在受精后15~20min、25~30min,先后排出第一、第二极体，完成第一次和第二次成熟分裂，在受精后30min左右先后形成雄原核和雌原核；雌、雄原核各自形成染色体组，在卵子中央发生联合，染色体排列于赤道板上，形成第一次有丝分裂的中期分裂相；受精后45min左右，受精卵进行第一次卵裂，形成2个体积不等的卵裂球；受精75min后，受精卵开始第二次卵裂，90min后形成4个卵裂球，进入4细胞时期；6h后受精卵发育至桑葚期，8~10h进入囊胚期，12~15h后发育至担轮幼虫，27~30h左右发育成D形幼虫，5d左右进入壳顶幼虫时期，17d后幼虫陆续开始出现眼点，22d后发育为附着幼虫，而后在30d左右变态为附着稚贝。研究中还发现了少数多精入卵现象，该过程会影响受精卵的正常分裂，造成胚胎发育畸形乃至死亡。研究结果可为近江牡蛎的苗种繁育、遗传育种等研究提供参考资料。
关键词：近江牡蛎；受精；荧光显微观察；早期胚胎发育
中图分类号：S917.4文献标志码：A
近江牡蛎(Crassostreaariakensis)隶属于双壳纲(Bivalvia),牡蛎科(Ostreidae),巨牡蛎属，是广温、广盐性贝类，自然种群多栖息于河口区，在我国南北方均有分布。近江牡蛎是我国重要的牡蛎养殖品种之一，具有较高的营养价值，也是构成牡蛎礁的主要种类，在滤除水体污染物、维持生物多样性等方面发挥重要的生态功能，素有“生态系统工程师”之美誉[1-6]。近年来，因海洋环境变化、过度捕捞、人工苗种补充有限等因素影响，我国沿海地区，尤其是北方海区近江牡蛎
自然资源量不断衰减[7-9]。开展人工苗种规模化繁育可为补充自然苗种和资源增殖提供支撑和保障，同时也是进行种质改良的必要前提。
受精及早期胚胎发育过程是水产经济动物苗种繁育、遗传育种领域的重要研究内容。充分了解养殖对象的受精和胚胎发育特点，可为人工苗种培育、细胞工程育种等工作提供重要参考。采用普通光学显微镜和荧光显微观察技术进行观察具有简便、清晰、直观等优点，已在多种经济贝类受精过程的核行为变化和胚胎早期发育观
收稿日期：2022-02-24
基金项目：国家重点研发计划项目(2018YFD0900104);中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(2021XT01);山东省重大科技创新工程项目(2019JZZY020706)
作者简介：王岩(1996—),女，硕士研究生，研究方向为贝类遗传育种。E-mail:2711681419@qq.com通信作者：刘志鸿，研究员。E-mail:liuzh@ysfri.ac.cn
第3期王岩，等：近江牡蛎受精过程、胚胎及早期幼虫发育特征353
察相关研究中应用。例如，有国外学者利用荧光显微观察技术对合浦珠母贝(Pinctadamartensii